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ELISA試劑盒中的稀釋液是實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵輔助試劑,其主要作用包括以下方面:
調(diào)整濃度?
用于將標(biāo)準(zhǔn)品、抗體或樣本稀釋至適合檢測的濃度范圍,確保信號強(qiáng)度在試劑盒的線性檢測范圍內(nèi)?。例如,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液需維持梯度濃度的準(zhǔn)確性,而樣品稀釋液則需降低基質(zhì)干擾?。
維持穩(wěn)定性?
稀釋液通常含緩沖體系(如PBS)和穩(wěn)定劑(如BSA、甘油),可保護(hù)抗體或抗原的活性,防止降解或失活?。部分稀釋液還含防腐劑(如疊氮鈉)以延長保存時(shí)間?。
減少非特異性結(jié)合?
通過添加封閉蛋白(如BSA或血清),稀釋液能降低抗體與樣本中非目標(biāo)位點(diǎn)的結(jié)合,從而減少背景信號,提高檢測特異性?。
優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件?
稀釋液的pH值和離子強(qiáng)度需與實(shí)驗(yàn)體系匹配,避免破壞蛋白質(zhì)結(jié)合反應(yīng)。例如,ELISA包被液需維持蛋白三維結(jié)構(gòu)以增強(qiáng)結(jié)合效率?。
常見稀釋液類型及用途對比
類型 主要用途 典型成分
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 精確稀釋標(biāo)準(zhǔn)品,建立濃度梯度 嚴(yán)格緩沖體系、穩(wěn)定劑?
樣品稀釋液 降低樣本基質(zhì)效應(yīng),適配檢測范圍 封閉劑(BSA)、表面活性劑?
抗體稀釋液 保護(hù)抗體活性,減少非特異性結(jié)合 緩沖液、甘油、防腐劑?
使用注意事項(xiàng)
現(xiàn)配現(xiàn)用?:部分稀釋液(如含酶標(biāo)記物的工作液)需臨時(shí)配制,避免活性下降?。
梯度稀釋?:標(biāo)準(zhǔn)品需通過倍比稀釋法確保濃度準(zhǔn)確性,避免誤差累積?。
匹配樣本類型?:血清/血漿樣本需用含相同基質(zhì)的稀釋液,細(xì)胞上清樣本建議用培養(yǎng)基稀釋?。
注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產(chǎn)品說明請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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